透射電子顯微鏡(TEM)是研究材料微結(jié)構(gòu)zui直接的表征技術(shù)之一,能夠在納米到原子尺度對材料微結(jié)構(gòu)進(jìn)行成像與分析,目前,應(yīng)用于材料的電學(xué)參數(shù)表征方法可以分為兩大類:一類為宏觀尺度技術(shù),比如四點(diǎn)探針法或范德堡法,光學(xué)測量等,允許快速檢測,但只能提供直流電導(dǎo)率等單一參數(shù)信息,另一類為納米尺度的技術(shù),如拉曼光譜、原子力顯微鏡、掃描電鏡、透射電鏡等,能夠得到分辨率很高的圖像,然而通常需要復(fù)雜的樣品制備步驟,并且測量速度十分緩慢,無法實(shí)現(xiàn)高速測量。
2切片厚度50~100nm為宜:太薄反差低;太厚反差好,但結(jié)構(gòu)重疊,電子束不能穿透;,3切片應(yīng)耐電子束的強(qiáng)烈照射,不變形不升華;,4切片能夠適當(dāng)被染色,保證一定的反差;,5切片均勻,無影響拍照的皺褶、刀痕或染色污染,其中,DigitalMicrograph不僅能夠自動(dòng)識(shí)別Gatan公司電鏡拍攝的dm3、dm4、Tif文件中的標(biāo)尺、放大倍數(shù)、儀器型號(hào)等信息,還能夠?qū)D片中進(jìn)行上偽色突出對比度、選區(qū)傅里葉變換、劃線取向灰度分析等。
鋨酸是強(qiáng)氧化劑,固定脂類、膜結(jié)構(gòu),有電子染色作用,3脫水,用適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑取代組織和細(xì)胞中的游離態(tài)水分,使之能與包埋劑混合,脫水要徹底,更換液體動(dòng)作要迅速,脫水時(shí)間不宜過長,且固定后的樣品要充分漂洗,4滲透、包埋與聚合,4,1滲透,2包埋與聚合,加溫在60℃聚合形成固體基質(zhì),牢固地支撐整個(gè)細(xì)胞結(jié)構(gòu)或組織,制成適于機(jī)械切割的固體樹脂包埋塊,利于切片,常用玻璃刀、鉆石刀進(jìn)行超薄切片,刀上要裝水槽,并注入槽液。